RIPA裂解液是一种经典的细胞组织快速裂解液,其名称“RIPA”源于放射免疫沉淀分析(Radio Immunoprecipitation Assay),主要适用于从动物细胞和组织中提取可溶性蛋白。该裂解液具有多种配方,一般根据裂解强度可分为强、中、弱三种类型。用于普通的Western、IP,推荐使用RIPA组织/细胞裂解液(中),裂解细胞或组织后,没有非常粘滞的透明状DNA团块形成,便于后续操作。对于某些特殊蛋白的IP,CO-IP可以使用较为温和的裂解液例如RIPA组织/细胞裂解液(弱) 。如果发现RIPA组织/细胞裂解液(中)效果不是非常理想,可以尝试使用裂解强度更高的裂解液例如RIPA裂解液(强)。
RIPA组织/细胞裂解液(套装)含有 RIPA组织/细胞裂解液(强)、 RIPA组织/细胞裂解液(中)和 RIPA组织/细胞裂解液(弱)各50 mL,便于实验时探索不同的实验条件。本品已添加金属离子螯合剂EDTA,但不含广谱蛋白酶抑制剂。用户可根据实验需要,自行添加PMSF、蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂等。
冰袋运输;4℃保存;有效期24个月。
货号 |
PC101 |
PC102 |
PC103 |
产品名称 |
RIPA组织/细胞裂解液(强) |
RIPA组织/细胞裂解液(中) |
RIPA组织/细胞裂解液(弱) |
有效裂解成分 |
Triton X-100 sodium deoxycholate SDS |
NP-40 sodium deoxycholate SDS |
NP-40 sodium deoxycholate |
裂解强度 |
强 |
中 |
温和 |
膜蛋白提取 |
很好 |
较好 |
一般 |
胞浆蛋白提取 |
很好 |
很好 |
很好 |
核蛋白提取 |
很好 |
很好 |
很好 |
主要用途 |
WB,IP |
WB,IP |
WB,IP,CO-IP |
1. 需自备PMSF或选购本司蛋白酶抑制剂(货号:PC201),磷酸酶抑制剂(货号:PC202)及蛋白磷酸酶抑制剂(货号:PC205)。
2. 裂解样品的所有操作应在冰上或 4℃ 环境下进行,以维持蛋白稳定性。
3. 经RIPA裂解液提取的蛋白样品,推荐使用BCA法测定蛋白浓度,可选用本司快速BCA蛋白浓度测定试剂盒测(货号:PD101)。请注意,由于本品中含有较高浓度的去垢剂,不宜采用 Bradford 法测定蛋白浓度。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
5. 本产品仅作科研用途!
Q1:RIPA 裂解液的裂解产物出现一小团透明胶状物。
A1:这是正常现象,该透明胶状物为含有基因组 DNA 等复合物。在不检测和基因组 DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理(于冰上操作)打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如 NF-kappaB、p53 等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
Q2:RIPA裂解液的裂解产物出现细小白色细胞团块。
A2:该现象通常为裂解不充分的表现。白色团块主要成分为未被完全裂解的细胞团、细胞骨架网络或变性聚集的蛋白质。对于多数可溶性胞浆蛋白和普通膜蛋白的检测,可通过剧烈涡旋或加强吹打等方式促进裂解;若团块仍不消散,建议进行短暂超声处理(于冰上操作),随后离心取上清用于后续实验。若目标蛋白为对机械剪切力敏感或需保持完整蛋白复合物结构,则应避免超声,可尝试适当增加裂解液用量并间歇性轻柔吹打,温和完成裂解,或者选用较温和的RIPA裂解液。